A extração de DNA é o primeiro passo na utilização de técnicas moleculares, este processo é essencial para obter a eficiência desejada na amplificação dos protocolos que usam PCR.
Quando falamos sobre o processo de PCR, destacamos que a escolha correta do kit é decisiva em relação a sensibilidade de detecção, tempo de espera entre as etapas, falhas de manipulação e resultado final.
Existem diversas formas de realizar a extração do DNA e RNA, cada maneira é destinada a uma aplicação distinta. São inúmeros métodos estabelecidos a fim de isolar moléculas de DNA a partir de materiais biológicos como sangue, saliva, urina e outros fluidos corporais.
A extração e purificação de DNA são de importância absoluta para áreas de biotecnologia, médica e forense. Um estudo que permite identificar a causa de doenças genéticas, distinguir e analisar vírus ou bactérias, determinar paternidade e até mesmo criar organismos geneticamente modificados.
Entretanto, alguns dos procedimentos são triviais na realização de isolamento e purificação de DNA. Confira:
Etapa de Lise:
Este é o primeiro passo, que consiste na quebra da célula, que possibilita a exposição do DNA.
Ligação:
A etapa onde uma membrana sílica retém e concentra o DNA.
Etapa de Lavagem:
É na lavagem que acontece a quebra e emulsionamento da gordura e das proteínas que formam a membrana da célula. Isto normalmente é feito utilizando soluções detergentes por auxílio de meios de centrifugação. Nessa parte do processo são removidos resíduos contaminantes.
Etapa de Eluição:
Por fim ocorre a liberação dos ácidos nucleicos da membrana, chamados de DNA e RNA. Que proporcionam o DNA purificado, pronto para ser utilizado em diversas aplicações.
Rendimento e qualidade do DNA extraído dependem do kit que é utilizado e interfere no resultado final dos testes. A obtenção de DNA de alta qualidade é essencial, garantindo assim o sucesso das etapas seguintes até a finalização do procedimento.
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